NY∕T 3072-2017 禽结核病疹断技术(农业)
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15 |
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日期: |
2021-12-24 |
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ICS 11 .220,B 41 NY,中华人民共和国农业行业标准,NY/T 3072一2017,禽结核病诊断技术,Diagnostic techniques for avian tuberculosis,2017 - 06 - 12 发布2017 - 10 - 01 实施,中华人民共和国农业部发布,目U 吕,本标准按照GB/ T 1. 1一2009 给出的规则起草,本标准由农业部兽医局提出,本标准由全国动物卫生标准化技术委员会CSAC/ TC 18 1)归口,本标准起草单位:中国兽医药品监察所,本标准主要起草人:朱良全、丁家波、蒋卉、毛开荣、彭小薇、王楠、徐磊、张磊,NY/ T 3072-2017,I,NY/T 3072一2017,引,禽结核病( a vian tu berculosis) 是由禽分枝杆菌种禽型分枝杆菌亚种感染引起禽的一种慢性传,染病,该病呈世界性分布,多呈散发性。该病,血、鸡冠萎缩、破行以及产蛋减少,明显的季节性和地区性,旦传人养禽场,则长,类动物疫病,本标准,报告,禽结,或排泄物中,分枝杆菌,型分枝杆,subsp.,片段主要用,4 个亚种中,杆菌种、人/,H,呼吸道感染,呈慢性经过,渐进性消瘦、贫,因衰竭或肝破裂而突然死亡。无,肉芽肿和干酷样结节。一,疫技术规范》,国兽药典三部,表的相关研究,s) 、林鸽,15901 基因,分枝杆菌,结核分枝,NY / T 3072-2017,禽结核病诊断技术,1 范围,本标准规定了禽结核病临床诊断、病原分离与鉴定、病原核酸检测及免疫学检测的诊断技术方法和,试验程序,本标准适用于禽结核病的诊断、监测和检疫,皮内变态反应不适用于野鸡、火鸡、水禽等其他禽类,2 规范性引用文件,下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件,仅注日期的版本适用于本文,本。凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件,GB 19489 实验室生物安全通用要求,3 缩略语,下列缩略语适用于本文件,EDTA: 乙二胶四乙酸Cethylene diamine tetraacetic acid) ,IU : 国际单位C international units) ,PCR: 聚合酶链式反应Cpolymerase chain reaction) ,PPD: 提纯蛋白衍生物、提纯结核菌素Cpurified protein derivative) ,4 生物安全要求,在样品采集、样品处理、检测及废弃物处理过程中,应注意人员防护。其所涉及的实验操作,应按,GB 19489 的有关规定执行,5 临床诊断,5. 1 临床症状,以病禽消瘦、贫líI1、受侵器官组织结核性结节等为主要特征。病禽表现胸肌萎缩、胸骨突出或变形,冠、肉髦苍白。如果关节和骨髓发生结核,可见关节肿大、肢行;肺结核病禽可见呼吸困难;肠结核可引,起严重腹泻,5. 2 病理变化,5. 2. 1 特征性病变,在肠道、肝和脾上形成不规则的灰黄色或灰白色大小不等的结节,切开后可见结节外面有一层包,膜,包有黄白色干酷样物;不同大小的结节,有时融合成一个大的结节,在外观上呈瘤样轮廓,5. 2. 2 病理组织学检查,发病初期,结节中心为变质性炎症, 其周围被渗出物浸润,结节的外围是淋巴样细胞、上皮样细胞和,朗罕氏多核巨细胞。当病程进一步发展, 中心形成干酷样坏死,6 实验室诊断,6. 1 细菌学检查,l,NY/T 3072-2017,6. 1. 1 仪器与耗材,E 级生物安全柜、恒温培养箱C40 0C~4 20C) 、冰箱C20C ~ 80C , -20 0C) 、4 0C 离心机、生物显微镜、剪,刀、慑子、载玻片、接种环、染色盒等,6. 1.2 试剂,6. 1. 2. 1 除特别规定外,所用化学试剂均为分析纯,6.1 . 2.2 4% HZ S04 榕液: 配制方法见附录A 中的A. l ,6. 1.2.3 5% NaO H 溶液:配制方法见A. 2 ,6. 1. 2. 4 5 % HCl 溶液:配制方法见,6. 1. 2. 5 O. 1 %酣红指示剂:,6. 1. 2. 6 甘油蛋白: 配制,6. 1. 2. 7,6. 1. 3.1. 2,用剪刀,制成乳剂,指示剂,以2,动物试验,6. 1. 3. 2,6. 1. 3. 2. 1,对,病料为服状或干,6. 1. 3. 2. 2 细菌培,对于病变非典型,落再镜检。其接种、培养、,a) 接种。被检标本经消,料,直接接种到配,浆机匀浆,充分振摇5,滴酣红作,养和,2. 2 中d)J 。如,b) 培养。400C~ 420C 培养2 周~3 周。茹剪霄军结核分枝杆菌, 则形成湿润、弥漫状、光滑及星,状菌落,2,c) 涂片。先在玻片上涂布一层薄甘油蛋白,然后吸取标本l 滴~ 2 滴加其上,涂布均匀。如检验,标本为含脂肪较多的材料,在涂片制成后,可再加l 滴~2 滴二甲苯或乙酷覆盖于涂片之上,(以完全覆盖涂片为准) 。经摇动1 min ~ 2 min 脱脂后倾去,再滴加9 5%酒精作用1 min ~ 2,mm 以除去二甲苯,待酒精挥发后即可染色,d) 妻一尼氏CZiehl-Neel sen) 抗酸染色镜检。处理过的被检材料涂片后,经火焰固定,加苯酣复红,染色液覆盖,将玻片在火焰上加热至出现蒸汽(不能产生气泡) ,如此热染5 minC 如染色液干,酒,须加适量染液补充,以保持湿润) 。水洗(用自来水清洗染色面,清洗时滴瓶头不要直接对,NY/T 3072-2017,着染色面,而需要从侧面进行清洗未浸染的染料,防止将染色面洗掉。) ,然后滴加3 ……
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